分光光度計是一種常用的光學(xué)儀器，它采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源。光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。通過使用分光光度計，我們可以得到樣品的光譜信息，了解其吸收或透射特性，從而進(jìn)行定性和定量分析。

　　分光光度計的校驗是確保其準(zhǔn)確性和可靠性的重要步驟。以下是一些常見的分光光度計校驗方法：

　　1、波長準(zhǔn)確度的檢驗：

　　分光光度計在使用過程中，由于機(jī)械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進(jìn)行檢驗。

　　使用標(biāo)準(zhǔn)溶液，測量其在不同波長下的吸光度，并與已知波長下的吸光度進(jìn)行比較。如果存在差異，則需要調(diào)整儀器的波長設(shè)置，使其與真實的波長相匹配。

　　2、零點校準(zhǔn)：

　　將沒有樣品的純?nèi)軇┗蚩瞻兹芤悍湃霕悠烦刂?，調(diào)節(jié)儀器的零點位置，使其讀數(shù)為零。這可以消除系統(tǒng)漂移或背景噪音對測量結(jié)果的影響。

　　3、穩(wěn)定度的檢驗：

　　在零點不受光的條件下，用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至100%）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。

　　4、光的檢驗：

　　可見分光計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。

　　5、透射比正確度的檢驗：

　　用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。

　　6、線性校準(zhǔn)：

　　使用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行線性校準(zhǔn)。通過測量不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品，繪制吸光度與濃度之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)該曲線進(jìn)行樣品的定量分析，并驗證儀器的線性范圍和靈敏度。